Evaluación y comparación de la sensibilidad de los cebadores que amplifican los genes msp2 y msp5 de anaplasma marginale para el diagnóstico de la anaplasmosis bovina

Resumen

La bacteria A. marginale infecta los eritrocitos en bovinos, ocasionando un cuadro anémico que afecta la productividad del animal, siendo necesaria la aplicación de métodos de diagnóstico sensibles y específicos para el control y tratamiento de la enfermedad. En este sentido, las técnicas moleculares se han convertido en una herramienta ideal para el diagnóstico, por lo tanto, tomando en cuenta que en Venezuela se ha desado los cebadores 19A y 19B que amplifican el gen msp5 de la bacteria y el reciente diseño de los cebadores msp2A y msp2B, los cuales amplifican el gen msp2, se propuso evaluar la sensibilidad de ambos pares de cebadores, así como su potencial para el diagnóstico molecular. Para ello se procedió a realizar un ensayo a partir de diluciones seriadas de una muestra de ADN cuantificada de referencia positiva A. marginale en una población de 22 animales, mediante la técnica de PCR, empleando en ambos casos los cebadores 19A/B y msp2A/B, con fines comparativos. Los resultados obtenidos demostraron que la sensibilidad de los cebadores que amplifican los genes msp2 y msp5 fue de 0.01ng/μl, siendo similar más no idéntica, ya que la intensidad de las bandas fue mayor empleando los cebadores que amplificaron el gen msp5. Este hecho se evidenció al evaluar la población bovina, donde al utilizar los cebadores msp2A/B y 19A/19B, se obtuvo una prevalencia de 13,63% y 68,18% respectivamente, concluyendo que los cebadores 19A/B son mejores para el diagnóstico de A. marginale en muestras bovinas de campo.